In vitro evaluation of Sporothrix brasiliensis biotherapic

Sporothrix brasiliensisis one of themost virulent zoonosis which affects animals and humans. This fungus is responsible for subcutaneous infection and its contamination is possible through trauma to the skin. Sporotrichosis is highly prevalent in feline. And Rio de Janeiro appears to have the highest occurrence of cases. Objectives: This study aims to evaluate the in vitroefficacy of Sporothrix brasiliensisbiotherapic, with and without an association to allopathic medicine commonly used in the treatment.Methodology: Conidiumcells of Sporothrix brasiliensiswill be cultured in Potato dextrose agar (PDA) for 5 to 7 days and yeast cells in Brain heart infusion (BHI) for 3 to 5 days. After incubation, the cells will be scraped with a drigalski handle and filtered using cells strainer into a tube and centrifuge for 5 minutes at 3000 RPM. The cells will be resuspended with Phosphate buffered saline (PBS), centrifuge again,and finally resuspended in PBS. After preparing the inocule, the microplates will be prepared. There will be 5groups in vitro. The first one will be the control group, only fungi. The second will be the treatment of fungi with homeopathic medicine (Sporothrix brasiliensis30DH). The third group will be the homeopathic medicine in association with itraconazole. The fourth will be the treatment with itraconazole only. And the last group will be the fungi with dynamized distilled water 30DH. Sporothrix brasiliensis30DHwill be prepared according to Brazilian Homeopathic Pharmacopeia. Results and discussions: The experiments are still in progress and the results will be analyzed through Analysis of variance (ANOVA) to determine statistically significant differences. Previous articles based on biotherapic treatments demonstrated successful results, so our research group is conducting these experiments to evaluate the effect in this model. Conclusion: Experiments will be made to verify the efficacy of biotherapic on sporotrichosis treatments.

Análise histopatológica dos efeitos do bioterápico 200dh em camundongos infectados por Trypanosoma Cruzi / Histopathological analysis of the effects of 200dh biotherapeutic in mice infected with Trypanosoma Cruzi

O Trypanosoma cruzi é um protozoário que instaura uma infecção grave em seu hospedeiro vertebrado, podendo causar danos irreversíveis, principalmente em suas células musculares, conhecida como a doença tripanossomíase ou Doença de Chagas. dicação disponível no mercado, que combate esse parasito, não é completamente eficiente e produz danos indesejáveis e irreversíveis, fazendo-se necessário a busca por outros campos da medicina, em termos de medicação, para combater essa doença. Nesse sentido, pesquisas com medicamentos homeopáticos têm se revelado promissoras no combate ao parasito, sobretudo as formas amastigotas, que são mais difíceis de serem exterminadas. Os bioterápicos são os homeopáticos que obtiveram maior sucesso em relação à infecção por T. cruzi, uma vez que esses medicamentos possuem seu princípio ativo retirado do próprio parasito, suas toxinas, parte de membros, realizando uma terapia conhecida como isoterapia ­ cura pelo igual. Resultados encontrados indicam que o bioterápico 200dH atua coagindo o sistema imune a combater o T. cruzi em cobaias contaminadas, fomentando uma resposta imune celular e humoral mais eficiente do que a fisiológica. Acredita-se que esse medicamento atue estimulando as células de defesa, que passarão a responder de forma antígeno- -específico, favorecendo o combate de amastigotas. Esse processo, provavelmente, é iniciado pela estimulação do macrófago, que por sua vez, de acordo com os resultados encontrados, inicia uma cascata inflamatória, com predominância da via Th1, fomentando a produção de IL4, IL-10 e interferon, auxiliando no combate as amastigotas.

The trypanosoma cruzi is a protozoan that causes a serious infeccion in the vertebrate host, being capable of causing irreversible damages mainly in the muscle cells, also known as trypanosomiasis disease or Chagas Disease. The commercially available drug medication which fights this parasite is not completely efficient and causes undesirable and irreversible damages making it necessary to search for other fields of medicine in terms of medication to combat this disease. Therefore research with homeopathic medicines has being promising in the fight against the parasite, especially the amastigote forms, which are more difficult to be exterminated. Biotherapics are the homeopathic ones that have been more successful in relation to T. cruzi infection, since these drugs have their active principle removed from the parasite itself, its toxins, part of its members, performing a therapy known as isotherapy - cure by the same. The results indicates that the 200dH biotherapic acts by coercing the immune system to fight T. cruzi in contaminated guinea pigs, promoting a cellular and humoral imune response more efficient than the physiological one. It is believed that this medicine works by stimulating the defense cells which will respond in an antigen-specific manner favoring the fight against amastigotes. This process is probably initiated by the stimulation of the macrophage which in turn, according to the remains found, initiates an inflammatory cascade with predominance of the Th1 pathway, promoting the production of IL-4e IL-5 and interferon helping to combat amastigotes

Analyzing weight evolution in mice infected by Trypanosoma cruzi

Concerning the specificities of a longitudinal study, the trajectories of a subject's mean responses not always present a linear behavior, which calls for tools that take into account the non-linearity of individual trajectories and that describe them towards associating possible random effects with each individual. Generalized additive mixed models (GAMMs) have come to solve this problem, since, in this class of models, it is possible to assign specific random effects to individuals, in addition to rewriting the linear term by summing unknown smooth functions, not parametrically specified, then using the P-splines smoothing technique. Thus, this article aims to introduce this methodology applied to a dataset referring to an experiment involving 57 Swiss mice infected by Trypanosoma cruzi, which had their weights monitored for 12 weeks. The analyses showed significant differences in the weight trajectory of the individuals by treatment group; besides, the assumptions required to validate the model were met. Therefore, it is possible to conclude that this methodology is satisfactory in modeling data of longitudinal sort, because, with this approach, in addition to the possibility of including fixed and random effects, these models allow adding complex correlation structures to residuals.

Linear mixed model for weight analysis in mice infected by Trypanosoma cruzi

The use of linear mixed models for nested structure longitudinal data is called hierarchical linear modeling. Thismodeling takes into account the dependence of existing data within each level and between hierarchical levels. The process of modeling, estimating and analyzing diagnoses was illustrated through data on the weights of mice experimentally infected by Trypanosoma cruzi, divided into different treatment groups, with the purpose of verifying the evolution of their body weight as a result of usingdifferent types of biotherapeutics produced from Gallus gallus domesticus(chicken) serum to treat Trypanosoma cruzi. Through the model selection criteria AIC and BIC and the likelihood ratio test, a model was chosen to describe the data correctly. Model diagnoses were then performed by means of residual analysis for both levels and an analysis of influential observations to verify if any observations were signaled as influencing the fixed effects, the components of variance and the adjusted values. After the analysis, it was possible to notice that the observations that were signaled as influential had little impact on the Model chosen initially, so it was maintained, with no differences being evidenced between the treatments with the biotherapeutics tested; only the Time variable and the Random intercept were necessary to describe the weight of the mice.

Homeopathy and biotherapy in Bothrops asper envenomation

Snake envenomation by Bothrops asper is a common problem affecting cattle raising and rural workers in farms across Latin America. Control of hemorrhage must often be ensured at the site of the accident, as medical care and antivenom therapy might not be available on the premises. The aim of the present study was to investigate the effects of homeopathic medicine Phosphorus 6cH, biotherapy Bothrops asper 6cH and a homeopathic formula on hemorrhage induced by B. asper envenomation. Groups of mice received the investigated treatments before and after envenomation (minimal hemorrhagic dose) and the diameter and intensity of hemorrhage were assessed. When administered before envenomation, all 3 treatments reduced the hemorrhage diameter; the best results were achieved with formula administered 14 days before envenomation and Phos 6cH 7 days before. Among the animals treated after envenomation, Phos 6cH in 4 doses/hour exhibited the best results in terms of hemorrhage diameter and intensity. We conclude that both homeopathy and biotherapy exhibit considerable potential as alternative treatment to reduce hemorrhage induced by B. asper venom. (AU)

Acidentes por Bothrops asper afetam frequentemente o gado e trabalhadores rurais em toda a América Latina. Dado que tanto atenção médica quanto tratamento antiofídico podem não estar disponíveis no local do acidente, é necessário controlar a hemorragia in loco. O objetivo do presente estudo foi avaliar os efeitos do medicamento homeopático Phosphorus 6cH, bioterápico Bothrops asper 6cH e um complexo homeopático na hemorragia induzida por B. asper. Diferentes grupos de camundongos receberam os medicamentos testados antes e depois do envenenamento (dose hemorrágica mínima) e foram medidos o diâmetro e a intensidade da hemorragia. Quando administrados antes do envenenamento, os 3 tratamentos reduziram o diâmetro da hemorragia, obtendo-se os melhores resultados com o complexo administrado 14 dias antes e Phos 6cH 7 dias antes. Entre os animais tratados depois do envenamento, os melhores resultados em termos de diâmetro e intensidade da hemorragia foram obtidos com Phos 6cH em 4 doses/hora. Conclui-se que tanto a homeopatia quanto o bioterápico apresentam grande potencial como tratamento alternativo para reduzir a hemorragia induzida por B. asper. (AU)

Homeopathy and biotherapy in Bothrops asper envenomation

Snake envenomation by Bothrops asper is a common problem affecting cattle raising and rural workers in farms across Latin America. Control of hemorrhage must often be ensured at the site of the accident, as medical care and antivenom therapy might not be available on the premises. The aim of the present study was to investigate the effects of homeopathic medicine Phosphorus 6cH, biotherapy Bothrops asper 6cH and a homeopathic formula on hemorrhage induced by B. asper envenomation. Groups of mice received the investigated treatments before and after envenomation (minimal hemorrhagic dose) and the diameter and intensity of hemorrhage were assessed. When administered before envenomation, all 3 treatments reduced the hemorrhage diameter; the best results were achieved with formula administered 14 days before envenomation and Phos 6cH 7 days before. Among the animals treated after envenomation, Phos 6cH in 4 doses/hour exhibited the best results in terms of hemorrhage diameter and intensity. We conclude that both homeopathy and biotherapy exhibit considerable potential as alternative treatment to reduce hemorrhage induced by B. asper venom. (AU)

Acidentes por Bothrops asper afetam frequentemente o gado e trabalhadores rurais em toda a América Latina. Dado que tanto atenção médica quanto tratamento antiofídico podem não estar disponíveis no local do acidente, é necessário controlar a hemorragia in loco. O objetivo do presente estudo foi avaliar os efeitos do medicamento homeopático Phosphorus 6cH, bioterápico Bothrops asper 6cH e um complexo homeopático na hemorragia induzida por B. asper. Diferentes grupos de camundongos receberam os medicamentos testados antes e depois do envenenamento (dose hemorrágica mínima) e foram medidos o diâmetro e a intensidade da hemorragia. Quando administrados antes do envenenamento, os 3 tratamentos reduziram o diâmetro da hemorragia, obtendo-se os melhores resultados com o complexo administrado 14 dias antes e Phos 6cH 7 dias antes. Entre os animais tratados depois do envenamento, os melhores resultados em termos de diâmetro e intensidade da hemorragia foram obtidos com Phos 6cH em 4 doses/hora. Conclui-se que tanto a homeopatia quanto o bioterápico apresentam grande potencial como tratamento alternativo para reduzir a hemorragia induzida por B. asper. (AU)

Biotherapic 200dH is harmful to acute murine infection with Trypanosoma cruzi

Biotherapics employed to treat mice infected by Trypanosoma cruzi were carried out with encouraging results. The aim of this study was evaluated the effect of biotherapic of Trypanosoma cruzi 200dH, using two different schedules of treatment. Swiss male mice, aged 56 days-old were infected intraperitonealy with 1,400 blood trypomastigotes of Trypanosoma cruzi Y strain and were divided into groups: C.I.- infected animals, E.D. â€" Infected animals treated from the day 1 until the end of the experiment; 200dH S.D. â€" Infected animals treated on the day 1. Parasitological, clinical and immunological parameters were evaluated. The group of animals that received the medicine in a single dose presented higher value to total parasitaemia and lower value of pre patent period compared to control untreated group (p<0.05), as well as the number of amastigotes which was also higher for this group (S.D.) (p<0.05). Clinically, the S.D.group presented more stable temperature (p<0.05) but not presented another clinical difference among treatments. IL-6 and TNF-α presented similar dosage among treated groups as well as IL-4 and IL-10. IL-17A and INF-γ, presented highest values to S.D. group (p<0.05). All animals died until the 20th day of infection. The lack of improvement in clinical and parasitological parameters, the untimely death and the immunological imbalance display the harmful evolution of the experimental infection by T. cruzi using biotherapic 200dH. The results could be useful for homeopathic physicians. In human clinical use, the choice of dynamizations and treatment schedule should consider acute and chronic diseases to achieve the expected results. (AU)

Efeito de bioterápico na eosinofilia durante a SLMV experimental / Biotherapic effect in eosinophilia during experimental VLMS

O Toxocara canis (Tc) é um parasito pertencente ao filo Nematódeo que possui como hospedeiro definitivo os cães, O homem é hospedeiro paratênico e contamina-se acidentalmente ao ingerir ovos contendo larvas infectantes (L3) do parasito, as quais são liberadas e atravessam a mucosa intestinal, atingem a circulação, Durante este processo migratório, antígenos de excreção e secreção (TES) são liberados provocando intensa reação inflamatória, do tipo Th2, caracterizando a síndrome, denominada Larva Migrans Visceral (SLMV), As principais características desta doença crônica são as eosinofilias sanguínea e tecidual persistentes, Desse modo, torna-se importante a busca por terapias que contribuam com a redução dos quadros inflamatórios com intensa eosinofilia, Assim, o uso deste bioterápico, produzido a partir do extrato antigênico de ovos e larvas de (Tc), e seu efeito no recrutamento de leucócitos totais, células mononucleares e eosinófilos no sangue, para o espaço broncoalveolar e para a cavidade peritoneal de camundongos infectados pelo (Tc) foi investigado, Foram utilizados camundongos fêmeas (Swiss), divididos nos grupos: Controle (C), Infectado (Tc), Imunizado (Im+Tc) e Tratado (Tc+Bio), Os animais Tc, Im+Tc e Tc+Bio receberam 500 ovos/animal por gavagem, Posteriormente, os animais foram eutanasiados no 18º dia da infecção e o número das células nos compartimentos foi determinado, Os resultados obtidos demonstraram que, Im+Tc, assim como nos Tc+Bio tiveram redução significativa dessas células nos compartimentos analisados quando comparados grupo Tc, Assim, sugeriu-se que a bioterapia modulou negativamente o recrutamento de células inflamatórias, principalmente eosinófilos no sangue, pulmão e intestino demonstrando um potencial anti-inflamatório desse bioterápico na SLMV experimental...

The Toxocara canis (Tc) is a parasite that belongs to the nematode phylum and has dogs as definitive host. The men can be accidentally contaminated by ingesting eggs containing infective larvae of the parasite. These larvae, when ingested, pass through the intestinal mucosa, reach the portal circulation and migrate through different tissues of the host. During this process, excretory-secretory antigens (TES) are released causing an intense inflammatory reaction, the Th2 type, characterizing the syndrome, called Visceral Larva migrans (VLMS). The main features of this chronic disease are blood and tissue eosinophilias. Thus, it is important to search for therapies that may contribute to the reduction of inflammatory conditions with intense eosinophilia. In this study, we investigated the use of a biotherapic produced from the antigenic extract from eggs and larvae (Tc) and its effect on the recruitment of total leukocyte, mononuclear cells and eosinophils in blood, bronchoalveolar space and peritoneal cavity of mice infected with (Tc). Female mice (Swiss) were used divided in three groups: control (C), Infected (Tc) Immunized (Im + Tc) and Treaty (Tc + Bio). The animals Tc, Im + Tc and Tc + Bio received 500 eggs / animal by gavage. Subsequently, the animals were euthanized on day 18 after infection and the number of cells in the compartments was determined. Our results showed that, Im + Tc, as in Tc + Bio had reduced these cells in compartments analyzed compared to Tc group. Thus, it was suggested that the biotherapy negatively modulated the recruitment of inflammatory cells, particularly eosinophils in blood, lung and intestine demonstrating an anti-inflammatory potential of the biotherapic in the experimental VLMS...

Avaliação da eficácia de produtos isoterápicos no controle de Rhipicephalus (Boophilus) microplus / Evaluation of the efficacy of products isoterapicos in control of Rhipicephalus (Boophilus) microplus

O Rhipicephalus (Boophilus) microplus é responsável por consideráveis perdas na pecuária brasileira. O controle desse parasita tem sido feito, principalmente, com o uso de carrapaticidas, sendo os isoterápicos uma alternativa para seu combate. Objetivou-se neste trabalho analisar a eficiência da utilização da isopatia como ferramenta de controle alternativo do carrapato-do-boi. Foram utilizadas 18 fêmeas bovinas de raça europeia, mantidas em sistema de pecuária extensiva, no município de Canguçu, Rio Grande do Sul. Os animais foram divididos em grupo controle (Lote A) e grupo tratado com isoterápico (Lote B). O sal mineral foi utilizado como veículo para a administração da isopatia, sendo que o Lote A recebeu sal mineral com placebo (açúcar) e o Lote B sal mineral com isopatia. Os animais foram infestados artificialmente com 10 mil larvas deR. (B.) microplus , e no 20º, 21º e 22º dias pós-infestação, foram realizadas contagem e coleta de fêmeas ingurgitadas. As teleóginas de cada lote foram divididas ao acaso em nove grupos de dez indivíduos para análise dos parâmetros biológicos e posterior cálculo do Índice Nutricional e Índice de Eficácia Reprodutiva. Para comparação da média de teleóginas de cada grupo, foi empregada análise de variância e Teste LSD. Os bovinos tratados com isopatia apresentaram uma redução de 53,4% do número médio de teleóginas, quando comparados com o grupo não tratado (p = 0,001). Quanto aos padrões biológicos, não houve diferença estatística. Conclui-se que o uso de isopatia foi capaz de reduzir a infestação de R.(B.) microplus , mostrando-se uma alternativa promissora para o controle deste ixodídeo.(AU)

The Rhipicephalus (Boophilus)microplus is responsible for considerable losses in Brazilian cattle. The control of such parasites has been done mainly with the use of acaricides, and the isopathy is an alternative. The objective of this work is to analyze the efficiency of the use of isopathy as an alternative tool to control the cattle tick. We used 18 cows of the European race, kept in extensive livestock system in the municipality of Canguçu, Rio Grande do Sul, Brazil. The animals were divided into control group (Lot A) and group treated with isopathy (Lot B). Mineral salt was used as a vehicle for the administration of isopathy, Lot A received mineral salt with placebo (sugar) and Lot B received mineral salt with isopathy. The animals were artificially infested with 10 thousand larvae of R. (B.) microplus , and in the days 20, 21 and 22 post-infestation engorged females were counted and collected. The ticks from each batch were randomly divided into nine groups of ten subjects each for analysis of biological parameters and subsequent calculation of the Nutritional Index and the Effectiveness Reproductive Index. For comparison of average engorged females from each group were employed ANOVA and LSD Test. The animals treated with isopathy showed a 53.4% reduction in the average number of ticks when compared with the untreated group (p = 0.001). As for biological standards, there was no statistical difference. It is concluded that the use of isopathy was able to reduce infestation of R. (B.) microplus , showing up as a promising alternative to control this ticks.(AU)

Cationic topical formulations tested in high dilutions offers protective effects in fibroblast cells culture

Topical administration is a simple and comfortable form of cutaneous administration of drugs. However, in this route of administration the drug needs to overcome the barrier posed by the skin to reach an effective concentration. For this reason, many topical formulations are developed with a cationic component. The promotion of absorption occurs due to the disruption of the stratum corneum. But this cationic component has also high irritating potential to the skin. The biotherapics are medicines prepared from a toxic product or etiologic agent, following the homeopathic pharmacopoeia technique, and they are used mainly in cases of hipersensitization. In this experiment, high dilutions (HD) obtained from a cationic formulation were prepared and evaluated considering cell viability in “in vitro” mouse fibroblast (L929) culture cells model by a colorimetric MTT assay. No signs of toxicity were observed, which demonstrates the safety of these HD preparations to the healthy cells. The effectiveness of these HD was also investigated in cells damaged by cationic formulations. The results demonstrated that the HD 30c was the most effective preparation in preventing the cell damage caused by the tested irritating product, increasing cell viability from 56.6% (damaged cells) to 100% (similar to negative control group, p>0.05). These results provide evidence of the positive action of high dilutions against the exposure to a cytotoxic agent.

Bioterápicos de Candida albicans induzem alterações nos índices de adesão e na respiração celular / Biotherapics of Candida albicans induce changes in the levels of adhesion and in cellular respiration

Introdução: O gênero Candida spp é responsável por cerca de 80% das infecções fúngicas no ambiente hospitalar e constitui causa relevante de infecções sistêmicas em pacientes hospitalizados, especialmente em doentes graves e em imunocomprometidos, com predominância da Candida albicans. A adesão das leveduras às células epiteliais do hospedeiro é um potente estimulador para a formação de hifas, forma invasiva do fungo [1]. Os bioterápicos são medicamentos preparados a partir de produtos biológicos, elaborados conforme a Farmacopeia Homeopática Brasileira (FHB)[2], indicados para tratamento de infecções de etiologia conhecida, empregados com grande sucesso no tratamento clínico destas infecções. Os bioterápicos RC, desenvolvidos pelo médico brasileiro Roberto Costa (RC) são preparados a partir do agente etiológico íntegro e, segundo suas pesquisas, possuem maior capacidade de estimular o sistema imunológico do hospedeiro.

Uso de bioterápico no controle de pasteurelose em cunicultura: relato de caso / Use of biotherapeutics in control of pasteurellosis in rabbits: a case report

A pasteurelose é uma das principais doenças em cuniculturas, podendo provocar significativas perdas. O emprego de bioterápico é tratamento utilizado na ciência homeopática na qual pode se empregar o próprio agente etiológico para estimular o animal a sair da inércia e tornar-se novamente equilibrado. O resultado indicou que o bioterápico utilizado na cunicultura foi eficaz no tratamento da doença na dinamização 12CH.

In vitro behavior of Mycoplasmagallisepticumlive-type nosode / Comportamento in vitro do bioterápico tipo nosódio vivo mycoplasmagallisepticum / Conducta in vitro de nosodio vivo de mycoplasmagallisepticum

As a step of a doctoral research project, in this study a live-type nosode was prepared from microorganism Mycoplasmagallisepticum strain R (ATCC 93-08/19610) according to Costa model and the rules by Brazilian Homeopathic Pharmacopoeia. Live nosode was tested in vitro to assess safety when used to immunize domestic fowl (Gallus gallus) against infection by this microorganism and to investigate its behavior under laboratory conditions. M. gallisepticum was not shown to grow in fluid (broth) and solid (plate) modified Frey medium with dilutions 11d, 12d, 20d and 30d. Inhibition halos about 2.0 mm were observed around paper disks impregnated with live-type nosode in microorganism-sown Petri dishes, whereas disks impregnated with conventional antibiotic oxytetracycline exhibited 8.0 mm inhibition halos. Protein assessment by Folin-Lowry method showed protein absence in dilutions 12d and 30d and neither microbial DNA traces were found in PCR assay in dilutions 12d, 20d and 30d.

Una etapa de un proyecto de doctorado, en este estudio fue preparado un nosode vivo del microorganismo Mycoplasmagallisepticumcepa R (ATCC 93-08/19610) según el modelo de Costa y las normas de la Farmacopea Homeopática Brasileña. El nosode vivo fue testeado in vitro para determinar su seguridad cuando utilizado para inmunizar aves domésticas (Gallus gallus) contra la infección por este microorganismo e investigar su conducta en condiciones de laboratorio. Fue observado que M. gallisepticum no creció en medio modificado de Frey líquido (caldo) y sólido (placa) con las diluciones 11d, 12d, 20d y 30d. Fueron observados halos de inhibición de aproximadamente 2,0 mm alrededor de discos de papel impregnados con el nosode vivo en placas de Petri sembradas con el microorganismo, mientras fueron observados halos de inhibición de 8,0 mm en los discos impregnados con el antibiótico convencional oxitetraciclina. La medición de proteínas mediante el método de Folin-Lowry evidenció ausencia de proteínas con las diluciones 12d y 30d y ausencia de vestigios de DNA microbiano por PCR con las diluciones 12d, 20d y 30d.

Como parte do experimento de uma tese de doutorado, um bioterápico do tipo nosódio vivo utilizando o microrganismo Mycoplasmagallisepticum estirpe R (ATCC 93-08/19610) foi preparado de acordo com o paradigma desenvolvido por Costa, observando as normas da Farmacopeia Homeopática Brasileira. O nosódio vivo foi testado in vitro com a finalidade de avaliar a segurança de sua utilização para imunizar galinhas domésticas (Gallus gallus) contra a infecção pelo microrganismo M.gallisepticum, e também conhecer seu comportamento sob condições de laboratório. Não houve crescimento de M. gallisepticum no cultivo em meio de Frey modificado líquido (caldo) e sólido (placa) das diluições 11d, 12d, 20d e 30d, enquanto que as diluições 1d e 10d mostraram crescimento do microrganismo. Foram observados halos de inibição de cerca de 2,0 mm em torno de discos de papel impregnados com o nosódio vivo em placas de Petri cultivadas com o microrganismo, enquanto os discos impregnados com o antimicrobiano convencional oxitetraciclina apresentaram halos de inibição de 8,0 mm. A dosagem de proteína pelo método de Folin-Lowry identificou a ausência de proteínas nas diluições 12d e 30d, assim como também não foram encontrados traços de DNA microbiano na prova de PCR para as diluições 12d, 20d e 30d.

Effect of biotherapic of alternaria solani on the early blight of tomato-plant and the in vitro development of the fungus / Efeito do bioterápico de alternaria solani na pinta-preta em tomateiros e no desenvolvimento in vitro de fungos / Efecto del bioterápico de Alternaria solani e el tizón temprano del tomate y desarrollo in vitro del hongo

Background: homeopathy is a means permitted in organic agriculture to control disease and plagues; biotherapics are a practical means for farmers to intervene on the health of plants in agro-ecological systems of production. Aims: to establish whether a biotherapic of A. solani may interfere on the in vitro development of the fungus and whether it affects the severity of early blight on tomato-plants in greenhouse. Methods: the effect of the biotherapic on the fungus was evaluated through the percentage of germinated spores under microscope and the growth of colonies in a culture medium. Treatments used were: biotherapic 26cH, 27cH, 28cH, 29cH and 30cH; sterilized distilled water; and diluted and agitated hydroalcoholic solution. The effect of the biotherapic on the development of disease was evaluated in 4 experiments in greenhouse. Plants were kept in vases and subjected to artificial inoculation of the fungus after the application of treatments. Evaluation of disease was carried out through diagrammatic scale. Results: no treatment affected the germination of spores or the development of fungus colonies in the culture medium. In the first test, treatment 26cH differed from water in Tukey?s test at 5% but did not differed from diluted and agitated hydroalcoholic solution. In the second test, treatments 27cH and 28cH showed significant difference from both water and hydroalcoholic solution with an average control of disease of 57% and 62% respectively. The other 2 tests did nor exhibit any significant effect. Conclusions: there was no direct effect of the biotherapic on the fungus, but there was an effect on the severity of the disease. Factors affecting the efficiency of the biotherapic must be better understood before it can be recommended to farmers for the management of early blight in tomato-plants.

Introdução: a homeopatia é um recurso permitido na agricultura orgânica, para o controle de doenças e pragas; bioterápicos constituem numa maneira prática para produtores intervirem na saúde de plantes, em sistemas de produção agro-ecológico. Plantas de tomate podem ser afetadas por várias doenças [...] Objetivos: verificar se o bioterápico A. solani pode interferer no desenvolvimento in vitro do fungo e se afeta a severidade da pinta-preta em plantas de tomates produzidas em estufa. Metodos: o efeito do bioterápico sobre o fungo foi avaliado através da porcentagem de esporos germinados, observados por microscopia e pelo crescimento de colônias em meio de cultura. Os tratamentos usados foram: bioterápico 26cH, 27cH, 28cH, 29cH e 30cH; água deslitada esterelizada; solução hidroalcoólica diluída e agitada. O efeito do bioterápico no desenvolvimento da doença foi avaliado em 4 experimentos realizados em estufa. As plantas foram mantidas em vasos e submetidas à inoculação artificial do fungo, após a aplicação dos tratamentos. A doença foi avaliada usando-se escalas diagramáticas. Resultados: nenhum tratamento afetou a germinação de esporos ou o desenvolvimento de colônias de fungos, em meio de cultura. No primeiro experimento, o tratamento 26cH diferiu da água (teste de Tukey a 5%) mas não da solução hidroalcoólica diluída e agitada. No segundo, os tratamentos 27cH e 28cH apresentam diferenças significativas tanto em relação à água quanto à solução hidroalcoólica, com um controle da doença da ordem de 57% e 62% respectamente. Os outros 2 experimentos não apresentaram efeitos significativos. Conclusões: não há efeito direto do bioterápico no fungo, porém existe diferença na severidade da doença. Os fatores que afetam a eficiência do bioterápico devem ser melhor entendidos, antes de que sejam recomendados aos produtores, para o controle da pinta-preta em tomateiros.

Introducción: la garrapata del ganado Rhipicephalus (Boophilus) microplus produce serios problemas a los hacenderos brasileños especialmente porque desarrolla rápidamente resistencia a los agentes pesticidas. Por este motivo, asociado a otros factores como contaminación ambiental, humana y animal y los costos, se buscan abordajes alternativos. Objetivos: este estudio buscó evaluar la eficiencia de un bioterápico preparado de garrapatas en vacas infestadas. Métodos: 34 vacas lecheras de raza holandesa fueron divididas en 2 grupos; uno recibió 100 mg/día de suplemento mineral impregnado con bioterápico 12cH durante 6 meses y después, en días alternados hasta completar 28 meses de tratamiento; el otro recibió apenas el suplemento mineral (control). Después de 28 meses de tratamiento, garrapatas hembra ingurgitadas fueron recogidas en ambos grupos, contadas y pesadas; fueron realizados pruebas in vitro para medir la masa de garrapatas; la masa de huevos, la tasa de eclosión de huevos y la eficiencia reproductiva. Resultados: hubo diferencias significativas entre los 2 grupos en todos los parámetros evaluados ? masa de garrapatas (p=0,0008), masa de huevos (p=0,0044), tasa de eclosión de huevos (p=0,0017) y eficiencia reproductiva (p=0,0044). Conclusión: el tratamiento con bioterápico de garrapata redujo significativamente la masa de hembras ingurgitadas y la deposición y eclosión de huevos, resultando en disminución de la eficacia reproductiva de las garrapatas.

Efficiency of tick biotherapic on the control of infestation by rhipicephalus (boophilus) microplus in dutch dairy cows / Eficiência de bioterápico de carrapato no controle da infestação por rhipicephalus (boophilus) microplus em vacas leiteiras de raça holandesa / Eficiencia de bioterápico de garrapata para control de la infestación por Rhipicephalus (Boophilus) microplus en vacas lecheras de raza holandesa

Background: cattle tick Rhipicephalus (Boophilus) microplus poses serious problems for farmers in Brazil, especially because the parasite easily develops resistance to pesticide agents. For this reason, together with other factors including environmental, human and animal contamination and costs, alternative approaches have been sought for. Aims: this study sough to evaluate the efficiency of a tick biotherapic on tick-infested cows. Methods: 34 dairy Dutch cows were divided in 2 groups: one group received 100g/day of mineral salt supplement impregnated with tick biotherapic 12cH for 6 months, and then in alternate days with tick biotherapic 30cH to complete 28 months of treatment; the other group (control) received only the mineral salt supplement. After 28 months of treatment, engorged Rhipicephalus (boophilus) microplus females were collected in both groups, counted and weighed; in vitro tests were carried out to assess mass of ticks; egg mass; egg-hatching rate; and reproductive efficiency. Results: There was significant difference between both groups for all parameters evaluated; tick-mass (p = 0.0008); egg mass (p=0.0044); egg-hatching rate (p= 0.0017); and reproductive efficiency (p = 0.0044). Conclusion: treatment with tick biotherapic significantly decreased the mass of engorged females, deposition and hatching rate of eggs, resulting consequently in the decrease of the reproductive efficiency of ticks.

Introdução: os carrapatos do gado Rhipicephalus (Boophilus) microplus representam um sério problema para os criadores brasileiros, especialmente porque desenvolvem rapidamente resistência aos pesticidas. Por isso, junto a outros fatores incluindo contaminação ambiental, humana e animal, assim como os custos, têm sido procuradas abordagens alternativas. Objetivos: avaliar a eficiência de um bioterápico desenvolvido a partir de carrapatos em vacas infestadas. Métodos: 34 vacas leiteiras de raça holandesa foram divididas em 2 grupos; um recebeu 100 mg/dia de suplemento salino mineral impregnado com o bioterápico 12cH durante 6 meses e após 30cH em dias alternos até completar 28 meses de tratamento; o outro grupo (controle) recebeu só o suplemento mineral. Após 28 meses de tratamento foram coletadas fêmeas ingurgitadas do carrapato em ambos os grupos, contadas e pesadas, e foram realizados testes in vitro para determinar a massa de parasitas; massa de ovos; taxa de eclosão dos ovos; e eficiência reprodutiva. Resultados: houve diferença significativa entre ambos os grupos em todos os parâmetros avaliados ? massa de parasitas (p=0,0008); massa de ovos (p=0,0044); taxa de eclosão de ovos (p=0,0017) e eficácia reprodutiva (0,0044). Conclusão: o tratamento com bioterápico de carrapato diminuiu significativamente a massa de fêmeas ingurgitadas e a deposição e taxa de eclosão, resultando, consequentemente, na diminuição da eficiência reprodutiva dos carrapatos.

Introducción: la garrapata del ganado Rhipicephalus (Boophilus) microplus produce serios problemas a los hacenderos brasileños especialmente porque desarrolla rápidamente resistencia a los agentes pesticidas. Por este motivo, asociado a otros factores como contaminación ambiental, humana y animal y los costos, se buscan abordajes alternativos. Objetivos: este estudio buscó evaluar la eficiencia de un bioterápico preparado de garrapatas en vacas infestadas. Métodos: 34 vacas lecheras de raza holandesa fueron divididas en 2 grupos; uno recibió 100 mg/día de suplemento mineral impregnado con bioterápico 12cH durante 6 meses y después, en días alternados hasta completar 28 meses de tratamiento; el otro recibió apenas el suplemento mineral (control). Después de 28 meses de tratamiento, garrapatas hembra ingurgitadas fueron recogidas en ambos grupos, contadas y pesadas; fueron realizados pruebas in vitro para medir la masa de garrapatas; la masa de huevos, la tasa de eclosión de huevos y la eficiencia reproductiva. Resultados: hubo diferencias significativas entre los 2 grupos en todos los parámetros evaluados ? masa de garrapatas (p=0,0008), masa de huevos (p=0,0044), tasa de eclosión de huevos (p=0,0017) y eficiencia reproductiva (p=0,0044). Conclusión: el tratamiento con bioterápico de garrapata redujo significativamente la masa de hembras ingurgitadas y la deposición y eclosión de huevos, resultando en disminución de la eficacia reproductiva de las garrapatas.

Influência do grupo genético, condição sexual e tratamento antiparasitário nas medidas de área de olho do lombo e espessura de gordura in vivo e na carcaça de bovinos de corte / Influence of breed, gender condition, and anti-parasitic treatment on the measurements of in vivo rib eye area and fat thickness and on the carcass of beef cattle

Foram estudados 48 bovinos machos oriundos de inseminação artificial, criados em pasto, sendo 24 (12 Nelore e 12 F1 ½ Red Angus-Nelore ) tratados com antiparasitários alopáticos e 24 (mesmo número de puros e cruzados) tratados com o antiparasitário bioterápico Fator C&MC. Os animais foram desmamados aos oito meses, metade de cada subgrupo genético (6) foi castrado aos 13 meses e todos abatidos aos 32 meses, com o objetivo de verificar a influência do tratamento antiparasitário, do grupo genético e da condição sexual sobre as medidas de área de olho de lombo (AOL) e espessura de gordura de lombo (EGL). Usaram-se medidas de ultrassonografia no animal vivo (AOLU e EGLU) e na carcaça, plástico quadriculado e paquímetro (AOLC e EGLC). Os animais F1, os inteiros e os tratados com alopatia apresentaram peso vivo maior quando comparados aos Nelores, castrados e tratados com bioterápicos. Não houve diferença da AOLU e AOLC entre os grupos genéticos. EGLC foi mais alta nos cruzados. Os animais inteiros apresentaram AOLU e AOLC maiores que os castrados, e EGLU e EGLC menores. Foram altamente significativos os coeficientes de correlação entre as medidas por ultrassom e na carcaça para área de olho de lombo (0,87) e espessura de gordura do lombo (0,95).

Forty-eight male bovines, products of artificial insemination and raised on pasture, were studied, being 24 (12 Nelore, 12 F1 ½ Nelore ½ Red Angus) treated with allopathic antiparasitic drugs and 24 (same number of pure and crossbred) treated with a biotherapic antiparasitic drug Factor C&MC. Animals were weaned at eight months of age and half of each genetic subgroup (six) was castrated at 13 months of age. All animals were slaughtered at 32 months of age, in an attempt to evaluate the influence of antiparasitic treatment, genetic group, and gender condition in the measurements of rib eye area (AOL) and fat thickness (EGL) of loin. Measurements of ultrasonography were used for live animals (AOLU and EGLU), whereas a direct plastic grid reading of the eye muscle and a pachymeter (AOLC and EGLC) were used for carcasses. F1 animals, non-castrated, and those treated with allopathic drugs showed higher live weight when compared with Nelore, castrated, and biotherapic treated animals. There were no differences between genetic groups of AOLU and AOLC. EGLC was higher in crossbred animals. Non-castrated animals showed higher AOLU and AOLC when compared with castrated animals, and lower EGLU and EGLC. Correlation coefficients for ultrasound and carcass measurements were highly significant for rib eye area (0.87) and fat thickness (0.95).

Use of biotherapic in the control of the natural infestation by Boophilus microplus: pilot study / Uso do bioterapico no controle da infestação natural por Boophilus microplus: estudo piloto

In the control of tick-borne disease (TBD), resistance to chemical products has been reported and a concern with the preservation of the environment requires alternative procedures to control infestation by Boophilus microplus worldwide. The use of biotherapic preparations is one of such alternatives. The aim of this study was to evaluate the effects of a biotherapic mixture including B. microplus in naturally infested cattle. 27 animals were divided in 3 groups (n=9): I – control, received no treatment; II- treated with amitraz dip; III- treated with a standard commercial mixture of biotherapic 12cH, p.o. Group III presented a statistically significant decrease of ticks when compared to the control group (p < 0.05). There was no statistically significant difference between groups II (amitraz) and III (biotherapic) (p < 0.05). These results suggest that biotherapic preparations might be effective in the control of B. microplus in cattle.

No controle de enfermidades transmitidas por carrapatos tem sido notada a resistência a produtos químicos. A preocupação com a conservação do meio ambiente tem exigido procedimentos alternativos para controlar a infestação por Boophilus microplus, em todo o mundo. O uso de bioterápicos representa uma dessas alternativas. O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito de uma mistura de bioterápicos incluindo B. microplus, em gado bovino infestado naturalmente. 27 animais foram divididos em 3 grupos (n=9): I) controle sem tratamento; II) tratado com banho de amitraz; III) tratado com mistura comercial de bioterápicos 12 cH, via oral. O grupo III apresentou uma diminuição estatísticamente significativa de carrapatos, em comparação com grupo controle (p < 0,05). Não houve diferença significativa entre os grupo II e III (p < 0,05). Estes resultados sugerem que os preparados de bioterápicos podem ser eficazes para o controle de B. microplus em bovinos.